咽喉炎是一种常见的多发性的上呼吸道感染疾病，严重影响人们的正常生活和社会交往，如不及时治疗还能诱发其它病变，如急性鼻炎、急性鼻窦炎、急性扁桃体炎、肺部感染等，急性咽炎治疗不及时不彻底而反复发作则转为慢性咽炎，颈部放射治疗或其它物理性，化学性刺激，各种慢性疾病如贫血、便秘、下呼吸道慢性炎症、心血管疾病等也可继发慢性咽炎，慢性咽炎病程多在3个月以上，患者常因受凉、感冒、疲劳等原因使症状加重，因此咽炎既是咽部常见病又是难治愈的慢性病。中医认为咽喉乃阴经汇集之处，肺胃出入之门户，因此，风热之邪，侵袭肺胃，伤及阴津或身体阴虚火旺或外部刺激，均可导致咽喉肿痛，失音、沙哑等不适症状。也就是说咽喉炎症是由以下因素导致：一是由外感病毒、病菌引起；二是自身体虚，阴阳失调所诱发的；三是由于空气污染、粉尘、有害气体、放射治疗刺激咽部所致，中医辨证认为咽炎患者多为阴虚、气虚或痰热、兼风、热、痰型的体质，故而在治疗上常采用清热解毒，养阴生津，清肺化痰之法。西药类咽喉含片多为抗生素、磺胺类消炎药，主要含地奎氯胺、盐酸氯乙啶、西地碘等，具有局部消毒杀菌的作用，作用单一，对咽喉炎及全身治疗作用较弱。而目前市场上的糖果类喉片，其主要成分多为青果、罗汉果及大量薄荷油、桉树油类，以局部清凉为主，对咽喉炎的治疗没有什么作用。

 

　　发明专利CN200410012828.5，防治咽喉炎症的药物及制备方法，它由玄参、麦冬、蝉蜕、诃子、桔梗、板蓝根、胖大海、生地、甘草、西青果等中药组分按一定比例制成清膏后与糖粉或糖浆及其它辅料制备而成。该发明配方独特，纯中药制剂，治疗效果显著，克服西药制剂的不适口感。该发明具有清咽利喉，养阴生津，解毒泻火的功效，可以治疗咽喉肿痛，失音及上呼吸道炎症，临床上可广泛适用于男女老幼及体弱患者的口腔及咽喉炎症。

 

　　发明专利CN201110041139.7，一种治疗慢性咽喉炎的药物，其由牛蒡子10—15份、射干10—15份、山豆根10—30份、薄荷8—10份、金银花8—30份、连翘10—30份、桔梗10—15份、黄芩10—15份、生地10—30份、丹皮10—15份、生黄芪10—30份、胖大海8—12份、马勃8—10份、甘草3—5份组成。所述药物可以被制备成任何一种常用口服剂型。本发明药物具有疏散风热，清火解毒，宣肺透疹，利咽散结，止咳祛痰的功能，适用于治疗慢性咽喉炎，疗效好，不易复发，其治疗有效率达100%。

 

　　山大颜为茜草科九节属植物九节的干燥根，根叶药用，有清热解毒、消肿拔毒、祛风除湿之效，该植物成分对KB细胞还有显著的细胞毒作用。但利用山大颜提取物环烯醚萜苷作为作为治疗咽喉炎药物缺未见报道。

 

　　发明内容

 

　　为弥补现有技术中未见使用山大颜用于治疗咽喉炎药物的缺陷，同时对山大颜活性物质提取率低的问题，本发明提供一种治疗咽喉炎口服液的制备方法，同时描述了提高山大颜活性物质环烯醚萜提取率的方法。

 

　　本发明通过以下技术方案实现：

 

　　一种治疗咽喉炎口服液的制备方法，由以下步骤制备而得：

 

　　（1）取山大颜50~100份，粉碎成10~20目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量20%~30%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为20~30%，得到浓缩液Ⅰ；

 

　　（2）取浓缩液Ⅰ，加入10~15倍纯化水侵泡30~60min，回流提取2~3h，过滤，滤渣加6~8倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶3~6mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中45~55℃水浴酶解2~3h，酶解后过滤，滤渣加入6~8倍量纯化水，回流提取1~1.5h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心20~30min，将上清液浓缩，制得样品液；

 

　　（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：（10~12g）于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附1~2h，先用2~2.5BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数15~20%的乙醇溶液洗脱，流速为1~1.2BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末；

 

　　（4）取甘草20~50份，研磨碎，加水煎煮3次，分别抽滤，合并滤液，浓缩至含水量为20~30%，得到浓缩液Ⅱ；

 

　　（5）将环烯醚萜粉末、浓缩液Ⅱ与木瓜汁20~50份混合，灭菌后分装，即可得到即可得到治疗咽喉炎口服液。

 

　　作为本发明的进一步改进，利用甘草提取物和木瓜汁和环烯醚萜进行调配制备得到治疗咽喉炎口服剂，甘草提取物中主要为黄酮类物质和甘草甜素，具有多重药效作用，同时环烯醚萜苷能溶于黄酮类物质中，两者能促进各自药效发挥；木瓜汁中含有抗氧化作用的维生素C和胡萝卜素，能提高黄酮类物质和环烯醚萜苷的抗氧化能力，降低苦味，提高药效作用时间，木瓜汁所含的蛋白分解酵素，可以补偿胰和肠道的分泌，补充胃液的不足，有助于药物吸收。

 

　　作为本发明的进一步改进，所述步骤（1）第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为1.0~2.0，加水量为药材量的10~12倍，煎煮时间为3.8~4.5h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.0~7.5，加水量为药材药材量的10~12倍，煎煮时间为1.8~2.4h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5~10.0，加水量为药材量的8~10倍，煎煮时间为1.8~2.4h。

 

　　作为本发明的进一步改进，所述步骤（4）第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为2.0~3.0，加水量为药材量的12~16倍，煎煮时间为1.8~2.2h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.5~8.0，加水量为药材药材量的12~16倍，煎煮时间为0.8~1.2h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5~10.0，加水量为药材量的10~14倍，煎煮时间为0.8~1.2h。

 

　　煎煮法的高温在酸碱提取时，极容易引起中药成分的变化，影响中药成分的安全性和有效性，制约了热不稳定性药物在提取过程中的应用；介孔硅酸钙具有大比表面的吸附作用，在提取过程中，介孔能有效吸附中药成分，降低高温煎煮作用对中药活性成分的有害影响，同时介孔材料的大比表面积孔能更多的吸附山大颜提取液中的环烯醚萜苷，提高了山大颜中环烯醚萜苷的提取率和保持了其完整的物质活性。

 

　　作为本发明的进一步改进，所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：

 

　　（1）称取10~20份四水硝酸钙溶解到80~100份的蒸馏水中，充分搅拌1~2h使硝酸钙完全溶解，然后加入模板剂十六烷基三甲溴化铵6~10份，京尼平苷20~30份，在45~55℃下以120r/min速度搅拌1~1.5h，搅拌过程中逐渐形成白色凝胶；

 

　　以十六烷基三甲溴化铵为模板剂合成的介孔硅酸钙比表面积最大，表面形貌最好，类似蜂窝状，表面孔道相互贯通，为重金属离子的吸附提供优良的场所；

 

　　京尼平苷与环烯醚萜具有相似的结构，代替昂贵的环烯醚萜作为分析印记模板制备分子印迹介孔硅酸钙材料，在煎煮过程中能有效吸附环烯醚萜苷

 

　　（2）根据四水硝酸钙和九水硅酸钠中Ca：Si物质的量比为1：1称取九水硅酸钠，溶解于40~60份蒸馏水中，然后将此硅酸钠溶液缓慢滴加到硝酸钙溶液中，随着硅酸钠的加入，逐渐形成白色胶状物，反应4~5h后，在常温下陈化20~24h；然后用蒸馏水洗涤产物，再用无水乙醇进行抽提22~24h，以去除模板剂；将所得产物置于真空干燥箱中在40℃下干燥12~14h，将干燥后的产物研磨，即可得到介孔硅酸钙粉末；

 

　　作为本发明的进一步改进，所述介孔碳吸附柱制备方法如下：

 

　　所述介孔碳吸附柱制备方法如下：

 

　　（1）称取16~22份聚丙氧基-聚乙氧基-聚丙氧基三嵌段共聚物和10~20份0.2mol/L盐酸溶液混合于80~100份乙醇中，40℃下搅拌1h，依次加入20~26份正硅酸四乙酯和40~50份重量百分比20%的酚醛树脂乙醇溶液，继续搅拌2~3h后将其均匀涂覆于培养皿中，室温蒸发7~9h后置于烘箱中100℃下培养24h得到淡黄色透明薄膜；

 

　　（2）将透明薄膜从培养皿中刮下研磨，在N2保护下，置于管式炉中800~900℃煅烧5h便得到有序介孔碳-氧化硅复合物；

 

　　（3）将该复合物浸渍于10%的氢氟酸刻蚀24~26h，除去硅组分，然后分别用3~4倍量的体积分数5%氢氧化钠水溶液、1~2倍量的蒸馏水、3~4倍量的体积分数10%乙酸水溶液洗涤，最后用蒸馏水洗至中性，湿法装入色谱柱中，即得所需介孔碳吸附柱。

 

　　介孔碳吸附柱能更有力地吸附山大颜中环烯醚萜苷等苷类和萜类物质，但不吸附或极少吸附其他物质，具有更好的分离纯化效果，同时介孔结构能更多的吸附环烯醚萜苷物质，提高纯化率。

 

　　本发明的有益效果：

 

　　1、通过介孔材料辅助模拟人体肠道酸碱环境进行山大颜中环烯醚萜苷物质的提取，不仅有效提高了山大颜中药物质的提取率，同时降低了活性物质因高温受到的破坏程度；利用介孔碳材料不仅提高了纯化率，更使有效物质更多的保留。

 

　　2、通过本发明制备的口服液，环烯醚萜提取率高，其活性高，降低了成本，具有很好的经济效益。

 

　　具体实施方式

 

　　下面结合实施例对本发明进一步说明。

 

　　实施例1

 

　　一种治疗咽喉炎口服液的制备方法，由以下步骤制备而得：

 

　　（1）取山大颜50份，粉碎成10目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量20%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为20%，得到浓缩液Ⅰ；

 

　　所述煎煮方法为：第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为1.0，加水量为药材量的10倍，煎煮时间为3.8h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.0，加水量为药材药材量的10倍，煎煮时间为1.8h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5，加水量为药材量的8倍，煎煮时间为1.8h。

 

　　所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：

 

　　a.称取10份四水硝酸钙溶解到80份的蒸馏水中，充分搅拌1h使硝酸钙完全溶解，然后加入模板剂十六烷基三甲溴化铵6份，京尼平苷20份，在45℃下以120rmin速度搅拌1h，搅拌过程中逐渐形成白色凝胶；

 

　　b.根据四水硝酸钙和九水硅酸钠中Ca：Si物质的量比为1：1称取九水硅酸钠，溶解于40份蒸馏水中，然后将此硅酸钠溶液缓慢滴加到硝酸钙溶液中，随着硅酸钠的加入，逐渐形成白色胶状物，反应5h后，在常温下陈化24h；然后用蒸馏水洗涤产物，再用无水乙醇进行抽提24h，以去除模板剂；将所得产物置于真空干燥箱中在40℃下干燥12h，将干燥后的产物研磨，即可得到介孔硅酸钙粉末；

 

　　（2）取浓缩液Ⅰ，加入10倍纯化水侵泡30min，回流提取2h，过滤，滤渣加6倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶3mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中45℃水浴酶解2h，酶解后过滤，滤渣加入6倍量纯化水，回流提取1h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心20min，将上清液浓缩，制得样品液；

 

　　（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：10g于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附1h，先用2BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数15%的乙醇溶液洗脱，流速为1BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末；

 

　　（4）取甘草20份，研磨碎，加水煎煮3次，分别抽滤，合并滤液，浓缩至含水量为20%，得到浓缩液Ⅱ；

 

　　第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为2.0，加水量为药材量的12倍，煎煮时间为1.8h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.5，加水量为药材药材量的12倍，煎煮时间为0.8h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5，加水量为药材量的10倍，煎煮时间为0.8h。

 

　　所述介孔碳吸附柱制备方法如下：

 

　　a.称取16份聚丙氧基-聚乙氧基-聚丙氧基三嵌段共聚物和10份0.2mol/L盐酸溶液混合于80份乙醇中，40℃下搅拌1h，依次加入20份正硅酸四乙酯和40份重量百分比20%的酚醛树脂乙醇溶液，继续搅拌2h后将其均匀涂覆于培养皿中，室温蒸发7h后置于烘箱中100℃下培养24h得到淡黄色透明薄膜；

 

　　b.将透明薄膜从培养皿中刮下研磨，在N2保护下，置于管式炉中800℃煅烧5h便得到有序介孔碳-氧化硅复合物；

 

　　c.将该复合物浸渍于10%的氢氟酸刻蚀24h，除去硅组分，然后分别用3倍量的体积分数5%氢氧化钠水溶液、1倍量的蒸馏水、3倍量的体积分数10%乙酸水溶液洗涤，最后用蒸馏水洗至中性，湿法装入色谱柱中，即得所需介孔碳吸附柱。

 

　　（5）将环烯醚萜粉末、浓缩液Ⅱ与木瓜汁20份混合，灭菌后分装，即可得到治疗咽喉炎口服液。

 

　　本实施例环烯醚萜苷提取率为21.1%，纯化率为99.8%。

 

　　实施例2

 

　　一种治疗咽喉炎口服液的制备方法，由以下步骤制备而得：

 

　　（1）取山大颜叶100份，粉碎成20目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量30%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为30%，得到浓缩液Ⅰ；

 

　　第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为2.0，加水量为药材量的12倍，煎煮时间为4.5h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.5，加水量为药材药材量的12倍，煎煮时间为2.4h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为10.0，加水量为药材量的10倍，煎煮时间为2.4h。

 

　　所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：

 

　　a.称取20份四水硝酸钙溶解到100份的蒸馏水中，充分搅拌2h使硝酸钙完全溶解，然后加入模板剂十六烷基三甲溴化铵10份，京尼平苷30份，在45℃下以120r/min速度搅拌2h，搅拌过程中逐渐形成白色凝胶；

 

　　b.根据四水硝酸钙和九水硅酸钠中Ca：Si物质的量比为1：1称取九水硅酸钠，溶解于60份蒸馏水中，然后将此硅酸钠溶液缓慢滴加到硝酸钙溶液中，随着硅酸钠的加入，逐渐形成白色胶状物，反应5h后，在常温下陈化24h；然后用蒸馏水洗涤产物，再用无水乙醇进行抽提24h，以去除模板剂；将所得产物置于真空干燥箱中在40℃下干燥14h，将干燥后的产物研磨，即可得到介孔硅酸钙粉末；

 

　　（2）取浓缩液Ⅰ，加入15倍纯化水侵泡60min，回流提取3h，过滤，滤渣加8倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶3~6mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中55℃水浴酶解3h，酶解后过滤，滤渣加入8倍量纯化水，回流提取1.5h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心30min，将上清液浓缩，制得样品液；

 

　　（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：12g于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附2h，先用2.5BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数20%的乙醇溶液洗脱，流速为1.2BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末；

 

　　（4）取甘草50份，研磨碎，加水煎煮3次，分别抽滤，合并滤液，浓缩至含水量为30%，得到浓缩液Ⅱ；

 

　　第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为3.0，加水量为药材量的16倍，煎煮时间为2.2h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为8.0，加水量为药材药材量的16倍，煎煮时间为1.2h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为10.0，加水量为药材量的14倍，煎煮时间为1.2h。

 

　　所述介孔碳吸附柱制备方法如下：

 

　　a.称取22份聚丙氧基-聚乙氧基-聚丙氧基三嵌段共聚物和20份0.2mol/L盐酸溶液混合于100份乙醇中，40℃下搅拌1h，依次加入26份正硅酸四乙酯和50份重量百分比20%的酚醛树脂乙醇溶液，继续搅拌2h后将其均匀涂覆于培养皿中，室温蒸发7h后置于烘箱中100℃下培养24h得到淡黄色透明薄膜；

 

　　b.将透明薄膜从培养皿中刮下研磨，在N2保护下，置于管式炉中900℃煅烧5h便得到有序介孔碳-氧化硅复合物；

 

　　c.将该复合物浸渍于10%的氢氟酸刻蚀26h，除去硅组分，然后分别用4倍量的体积分数5%氢氧化钠水溶液、2倍量的蒸馏水、4倍量的体积分数10%乙酸水溶液洗涤，最后用蒸馏水洗至中性，湿法装入色谱柱中，即得所需介孔碳吸附柱。

 

　　（5）将环烯醚萜粉末、浓缩液Ⅱ与木瓜汁50份混合，灭菌后分装，即可得到治疗咽喉炎口服液。

 

　　本实施例环烯醚萜苷提取率为20.6%，纯化率为99.7%。

 

　　实施例3

 

　　一种治疗咽喉炎口服液的制备方法，由以下步骤制备而得：

 

　　（1）取山大颜叶80份，粉碎成15目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量25%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为25%，得到浓缩液Ⅰ；

 

　　第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为1.8，加水量为药材量的11倍，煎煮时间为4h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.2，加水量为药材药材量的11倍，煎煮时间为2h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.6，加水量为药材量的9倍，煎煮时间为2h。

 

　　所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：

 

　　a.称取15份四水硝酸钙溶解到90份的蒸馏水中，充分搅拌1h使硝酸钙完全溶解，然后加入模板剂十六烷基三甲溴化铵8份，京尼平苷25份，在45℃下以120r/min速度搅拌1h，搅拌过程中逐渐形成白色凝胶；

 

　　b.根据四水硝酸钙和九水硅酸钠中Ca：Si物质的量比为1：1称取九水硅酸钠，溶解于50份蒸馏水中，然后将此硅酸钠溶液缓慢滴加到硝酸钙溶液中，随着硅酸钠的加入，逐渐形成白色胶状物，反应5h后，在常温下陈化24h；然后用蒸馏水洗涤产物，再用无水乙醇进行抽提24h，以去除模板剂；将所得产物置于真空干燥箱中在40℃下干燥12h，将干燥后的产物研磨，即可得到介孔硅酸钙粉末；

 

　　（2）取浓缩液Ⅰ，加入12倍纯化水侵泡50min，回流提取2.5h，过滤，滤渣加7倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶5mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中50℃水浴酶解3h，酶解后过滤，滤渣加入7倍量纯化水，回流提取1.2h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心25min，将上清液浓缩，制得样品液；

 

　　（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：11g于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附1.5h，先用2.2BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数16%的乙醇溶液洗脱，流速为1.1BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末；

 

　　（4）取甘草30份，研磨碎，加水煎煮3次，分别抽滤，合并滤液，浓缩至含水量为25%，得到浓缩液Ⅱ；

 

　　第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为2.2，加水量为药材量的13倍，煎煮时间为2h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.6，加水量为药材药材量的13倍，煎煮时间为1h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5~10.0，加水量为药材量的12倍，煎煮时间为1h。

 

　　所述介孔碳吸附柱制备方法如下：

 

　　a.称取20份聚丙氧基-聚乙氧基-聚丙氧基三嵌段共聚物和15份0.2mol/L盐酸溶液混合于90份乙醇中，40℃下搅拌1h，依次加入22份正硅酸四乙酯和45份重量百分比20%的酚醛树脂乙醇溶液，继续搅拌2h后将其均匀涂覆于培养皿中，室温蒸发7h后置于烘箱中100℃下培养24h得到淡黄色透明薄膜；

 

　　b.将透明薄膜从培养皿中刮下研磨，在N2保护下，置于管式炉中850℃煅烧5h便得到有序介孔碳-氧化硅复合物；

 

　　c.将该复合物浸渍于10%的氢氟酸刻蚀24h，除去硅组分，然后分别用3倍量的体积分数5%氢氧化钠水溶液、1倍量的蒸馏水、3倍量的体积分数10%乙酸水溶液洗涤，最后用蒸馏水洗至中性，湿法装入色谱柱中，即得所需介孔碳吸附柱。

 

　　（5）将环烯醚萜粉末、浓缩液Ⅱ与木瓜汁35份混合，灭菌后分装，即可得到治疗咽喉炎口服液。

 

　　本实施例中，环烯醚萜苷的提取率为22.1%，纯化率为99.8%。