一种使用集热式磁力搅拌器进行短链淀粉纳米农药制备的方法

 

　　技术领域

 

　　本发明涉及一种农药，尤其涉及一种使用集热式磁力搅拌器进行短链淀粉纳米农药制备的方法，属于农药技术领域。

 

　　背景技术

 

　　苯醚甲环唑是三唑类杀菌剂,对子囊菌纲、担子菌纲和包括链格孢属、壳二孢属、尾孢霉属、刺盘孢属、球痤菌属、茎点霉属、柱隔孢属、壳针孢属、黑星菌属在内的半知病，白粉菌科、锈菌目及某些种传病原菌有持久的保护和治疗作用。它被广泛应用于果树、蔬菜等作物，有效防治黑星病，黑斑病、白腐病、斑点落叶病、白粉病、褐斑病、锈病、条锈病、赤霉病等。尤其对梨的黑斑病有良好防效。国内登记的己唑醇的剂型多为悬浮剂和水分散粒剂，少数为乳油。这些剂型在制备过程中或多或少都会加入一些对环境有危害的有机溶剂和表面活性剂；而本农药的制备基本不含对环境有害的成分。随着社会的发展，人们越来越重视对环境的保护，农药剂型朝着绿色环保的方向发展，这是目前需要解决的技术问题。

 

　　烯酰吗啉是一种新型内吸治疗性专用低毒杀菌剂，其作用机制是破坏病菌细胞壁膜的形成，引起孢子囊壁的分解，而使病菌死亡。除游动孢子形成及孢子游动期外，对卵菌生活史的各个阶段均有作用，尤其对孢子囊梗和卵孢子的形成阶段更敏感，若在孢子囊和卵孢子形成前用药，则可完全抑制孢子的产生。具有强内吸性。它对霜霉病、霜疫霉病、晚疫病、疫(霉)病、疫腐病、腐霉病、黑胫病等低等真菌性病害均具有很好的防治效果。可应用于葡萄、荔枝、黄瓜、甜瓜、苦瓜、番茄、辣椒、马铃薯、十字花科蔬菜。国内登记的烯酰吗啉的剂型多为水分散粒剂和悬浮剂，少数为微乳剂和可湿性粉剂。这些剂型在制备过程中或多或少都会加入一些对环境有危害的有机溶剂和表面活性剂。随着社会的发展，人们越来越重视对环境的保护，农药剂型朝着绿色环保的方向发展，这是目前需要解决的技术问题。

 

　　咪鲜胺为广谱性杀菌剂。其系抑制麦角甾醇生物合成，具有保护和铲除作用，对多种作物子囊菌和半知菌病害有显著防效。可用于防治禾谷类作物茎、叶、穗上的许多病害，如白粉病、叶斑病等；本品还能用于果树、蔬菜、蘑菇、草皮和观赏植物的许多病原菌。而本发明主要用于玉米大斑病的防治。国内登记的咪鲜胺的剂型多为水乳剂和乳油，少数为悬浮剂和可湿性粉剂。这些剂型在加工过程中或多或少都会加入一些对环境有危害的有机溶剂和表面活性剂。随着社会的发展，人们越来越重视对环境的保护，农药剂型朝着绿色环保的方向发展，这是目前需要解决的技术问题。

 

　　己唑醇属三唑类杀菌剂,甾醇脱甲基化抑制剂，对真菌尤其是担子菌门和子囊菌门引起的病害有广谱性的保护和治疗作用。破坏和阻止病菌的细胞膜重要组成成分麦角甾醇的生物合成，导致细胞膜不能形成，使病菌死亡。具有内吸、保护和治疗活性。能有效地防治子囊菌、担子菌和半知菌所致病害，尤其是对担子菌纲和子囊菌纲引起的病害如白粉病、锈病、黑星病、褐斑病、炭疽病等有优异的保护和铲除作用，对水稻纹枯病有良好防效。国内登记的己唑醇的剂型多为悬浮剂，少数为微乳剂和水分散粒剂。这些剂型在制备过程中或多或少都会加入一些对环境有危害的有机溶剂和表面活性剂。随着社会的发展，人们越来越重视对环境的保护，农药剂型朝着绿色环保的方向发展，这是目前需要解决的技术问题。

 

　　氟啶胺属2，6-二硝基苯胺类化合物，是保护性杀菌剂。它对交链孢属、葡萄孢属、疫霉属、单轴霉属、核盘菌属和黑垦菌属菌非常有效，对抗苯并咪唑类和二羧酰亚胺类杀茵剂的灰葡萄孢也有良好效果，兼有优良的控制食植性螨类的作用，对十字花科植物根肿病也有卓越的防效，对由根霉菌引起的水稻猝倒病也有很好的防效，对小麦赤霉病有良好防效。国内登记的氟啶胺的剂型多为悬浮剂，少数为可湿性粉剂和水分散粒剂。这些剂型在制备过程中或多或少都会加入一些对环境有危害的有机溶剂和表面活性剂。随着社会的发展，人们越来越重视对环境的保护，农药剂型朝着绿色环保的方向发展，这是目前需要解决的技术问题。

 

　　发明内容

 

　　本发明要解决的技术问题是：提供一种短链淀粉纳米农药及其制备方法，利用生物可降解材料制备高分散的纳米农药剂型，成本低，绿色环保，可以制备出持效期长，生物利用度高，残留低的农药产品，对促进农药减量使用，农业的可持续发展具有重要意义，有效的解决了上述的问题。

 

　　本发明的技术方案为：一种短链淀粉纳米农药，所述短链淀粉纳米农药包含有：短链淀粉和农药，其质量百分比为：短链淀粉50％-80％，农药20％-50％，所述农药为：苯醚甲环唑、烯酰吗啉、咪鲜胺、己唑醇或氟啶胺。

 

　　一种短链淀粉纳米农药的制备方法，所述方法步骤为：

 

　　一、制取短链淀粉；

 

　　二、称取短链淀粉加入到去离子水中制成短链淀粉液，高温高压灭菌；

 

　　三、将所得短链淀粉液进行水浴平衡，再放入超声机进行超声，完成溶解，得到短链淀粉溶液；

 

　　四、将农药加入乙醇、热醋酸或甲醇溶解，再把步骤三所得的短链淀粉溶液滴加到溶解完成的农药里，并把农药和短链淀粉溶液混合均匀进行使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌，离心，再用乙醇、热醋酸或甲醇洗涤三次，冷冻干燥得到短链淀粉纳米农药。

 

　　所述步骤二中，短链淀粉液的浓度为1％-10％。

 

　　所述步骤三中，水浴平衡时间为1-6h，温度70℃-90℃，超声机的超声频率为40KHz，超声时间为0.5-1h。

 

　　所述步骤四中：

 

　　所述农药为苯醚甲环唑，其质量百分数含量为95％，将10-1000mg苯醚甲环唑农药加入2-5ml乙醇里溶解，再把溶解完成的农药滴加入20-50ml短链淀粉液中混合均匀，使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌的转速为50-1700r/min，搅拌时间为2-10h，离心转速为3000-6000r/min，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h，制得短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药的包埋率为80％-95％；

 

　　所述农药为烯酰吗啉，其质量百分数含量为96％，将10-1000mg烯酰吗啉农药加入2-5ml乙醇里溶解，再把溶解完成的烯酰吗啉农药滴加入20-50ml短链淀粉液中混合均匀，使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌的转速为50-1700r/min，搅拌时间为2-10h，离心转速为3000-6000r/min，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h，制得短链淀粉纳米烯酰吗啉农药的包埋率为80％-96％；

 

　　所述农药为咪鲜胺，其质量百分数含量为95％，将10-1000mg咪鲜胺农药加入2-5ml热醋酸里溶解，再把溶解完成的咪鲜胺农药滴加入20-50ml短链淀粉液中混合均匀，使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌的转速为50-1700r/min，搅拌时间为2-10h，离心转速为3000-6000r/min，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h，制得短链淀粉纳米咪鲜胺农药的包埋率为70％-95％；

 

　　所述农药为己唑醇，其质量百分数含量为95％，将10-1000mg己唑醇农药加入2-5ml甲醇里溶解，再把溶解完成的己唑醇农药滴加入20-50ml短链淀粉液中混合均匀，使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌的转速为50-1700r/min，搅拌时间为2-10h，离心转速为3000-6000r/min，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h，制得短链淀粉纳米己唑醇农药的包埋率为70％-95％；

 

　　所述农药为氟啶胺，其质量百分数含量为98％，将10-1000mg氟啶胺农药加入2-5ml乙醇里溶解，再把溶解完成的氟啶胺农药滴加入20-50ml短链淀粉液中混合均匀，使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌的转速为50-1700r/min，搅拌时间为2-10h，离心转速为3000-6000r/min，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h，制得短链淀粉纳米氟啶胺农药的包埋率为75％-90％。

 

　　所述制取短链淀粉的方法步骤为：

 

　　A、称取淀粉，向淀粉中加入磷酸缓冲液，搅拌均匀，充分糊化，将其冷却至室温；

 

　　B、往糊化好的淀粉乳液里加入普鲁兰酶液，充分搅拌，放入水浴锅中进行酶解；

 

　　C、再把酶解后的淀粉液进行煮沸、离心，加入无水乙醇洗涤并沉淀，放入4℃冰箱静止一晚；

 

　　D、把静止好的淀粉液除去上清液，留下沉淀，将沉淀装入透析袋进行透析，把透析完成的淀粉液装入培养皿进行预冻处理后冷冻干燥，得到短链淀粉；

 

　　所述步骤A中，淀粉为蜡质玉米淀粉，淀粉乳液的质量百分比浓度为1％-10％，磷酸缓冲液的摩尔比为3molNacl：94molKcl：200molNa2HPO4：40molNaH2PO4，PH值为4-5。

 

　　所述步骤B中，普鲁兰酶液的配制为准确量取1ml加入55-100ml去离子水中，酶解时间为6-10h，温度为60℃。

 

　　所述步骤C中，煮沸时间是5-15min，离心转速为3000-5000r/min，用无水乙醇洗涤沉淀淀粉液的体积比为1：5。

 

　　所述步骤D中，透析袋截留分子量为MW:500-MW:1000，冷冻干燥温度为-80℃，压力为20-40Pa，冻干时间为12-24h。

 

　　本发明的有益效果是：与传统农药载体相比，本发明的纳米载体具有粒径小、比表面积大等特性，可以提高药剂的对靶沉积、转移效率和生物利用度，减少流失，降低农药残留与环境污染。同时，纳米载药粒子具有农药控释功能，可以保护环境敏感性农药，控制药物释放速度，延长持效期，减少淋溶、分解等药效损失。纳米农药是目前来说比较新型的农药剂型之一，纳米农药可以直接将水不溶性农药纳米化或者利用纳米材料通过偶联、吸附、包裹、镶嵌等方式负载农药构建纳米载药系统，有利于提高农药活性成分的溶解性、分散性、润湿性、均匀性、稳定性，降低农药残留与环境污染。

 

　　具体实施方式

 

　　为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合说明书附图对本发明作进一步的详细描述。

 

　　实施例1：准确称量2g有效成分为95％的苯醚甲环唑原药加入到50ml乙醇中完成溶解；再准确称量8g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成8％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入70℃的水浴锅中平衡1h，完成溶解。将50ml苯醚甲环唑药液滴加到8％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌2h，3000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥12h，得到20％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药。本法制备的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药粒径在100-500nm之间,包埋率在50％以上。取有效成分95％苯醚甲环唑原药和上述制备好的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.11ug/ml、0.21ug/ml、0.42ug/ml、0.84ug/ml、1.68ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将梨黑斑病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药和苯醚甲环唑原药的培养基上，将梨黑斑病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养7天，测得如下表一所示结果。

 

　　表一20％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药和95％苯醚甲环唑原药对梨黑斑病室内活力测定

 

　　注：同一列不同大小写字母表示在0.05，0.01水平差异显著。采用DPS7.05版本进行差异性分析，下同。

 

　　从表一中数据可得知，随着短链纳米苯醚甲环唑农药和苯醚甲环唑原药浓度的逐渐增大，对梨黑斑菌丝生长的抑制率也随之增加。其中，在相同浓度下，20％短链淀粉纳米苯醚甲环唑浓度为0.21ug/ml、0.42ug/ml、0.84ug/ml和1.68ug/ml时，对梨黑斑菌丝生长的抑制率都显著高于苯醚甲环唑原药的抑制率，其中，在1.68ug/ml时20％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药对梨黑斑菌丝生长的抑制率高达92.33％；而在浓度为0.42ug/ml、0.84ug/ml和1.68ug/ml时，20％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药的抑制率都极显著高于苯醚甲环唑原药对梨黑斑菌丝生长的抑制率。这表明通过短链纳米淀粉制成的纳米苯醚甲环唑农药对梨黑斑病菌丝生长的抑制效果比原药苯醚甲环唑要好。与传统农药相比，淀粉是自然界中存在的大分子物质，且无毒，通过用短链淀粉包合的农药具有环保、低毒且在一定程度上可以降低农药残留量的绿色农药。

 

　　实施例2：准确称量1g有效成分为95％的苯醚甲环唑原药加入到25ml乙醇中完成溶解；再准确称量1g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成1％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入90℃的水浴锅中平衡6h，完成溶解。将25ml苯醚甲环唑药液滴加到1％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌10h，6000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥24h，得到50％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药。本法制备的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药粒径在100-500nm之间,包埋率在90％以上。

 

　　取有效成分95％苯醚甲环唑原药和上述制备好的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.11ug/ml、0.21ug/ml、0.42ug/ml、0.84ug/ml、1.68ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将梨黑斑病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药和苯醚甲环唑原药的培养基上，将梨黑斑病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养7天，测得如下表二所示结果。

 

　　表二50％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药和95％苯醚甲环唑原药对梨黑斑病室内活力测定

 

　　从表二数据可知，随着农药浓度的增大，抑制率也随之增大。50％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药在不同浓度之间对梨黑斑菌丝生长的抑制率差异极显著；而在浓度为0.21ug/ml、0.42ug/ml、0.84ug/ml时，50％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药对梨黑斑菌丝生长的抑制率极显著高于苯醚甲环唑原药。同时，50％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药在5个浓度下对梨黑斑菌丝生长的抑制率均高于95％的苯醚甲环唑原药的抑制率，而在浓度为1.68ug/ml时，50％短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药对梨黑斑菌丝生长的抑制率达到了94.33％，95％的己唑醇原药仅为82.33％。

 

　　再通过表一和表二的数据对比可以看出，在相同的浓度时，50％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药对梨黑斑菌丝生长的抑制率都略高于20％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药。综上所述，3个农药对梨黑斑病菌丝生长抑制效果是：50％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药＞20％的短链淀粉纳米苯醚甲环唑农药＞95％的苯醚甲环唑原药。

 

　　实施例3：准确称量2g有效成分为96％的烯酰吗啉原药加入到50ml乙醇中完成溶解；再准确称量8g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成8％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入70℃的水浴锅中平衡1h，完成溶解。将50ml烯酰吗啉药液滴加到8％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌2h，3000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥12h，得到20％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药。本法制备的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药粒径在100-500nm之间,包埋率在80％以上。

 

　　取有效成分96％烯酰吗啉原药和上述制备好的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.07ug/ml、0.14ug/ml、0.27ug/ml、0.54ug/ml、1.08ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将马铃薯晚疫病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药和烯酰吗啉原药的培养基上，将马铃薯晚疫病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱18℃黑暗培养培养10天，测得如下表三所示结果。

 

　　表三20％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药和96％烯酰吗啉原药对马铃薯晚疫病室内活力测定

 

　　注：同一列不同小写字母表示在0.05水平差异显著。采用DPS7.05版本进行差异性分析，下同。

 

　　从表三中数据可得知，随着20％的短链纳米烯酰吗啉农药和96％的烯酰吗啉原药浓度的逐渐增大，对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率也随之增加。其中，在相同浓度下，20％的短链淀粉纳米烯酰吗啉浓度为0.14ug/ml、0.27ug/ml、0.54ug/ml、1.08ug/ml时对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率都显著高于烯酰吗啉原药，其中，在1.08ug/ml时20％短链淀粉纳米烯酰吗啉农药对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率高达92.11％，而烯酰吗啉原药仅为83.51％。这表明通过短链纳米淀粉制成的纳米烯酰吗啉农药对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制效果比原药烯酰吗啉要好。与传统农药相比，淀粉本身属于天然的大分子物质，无毒，通过用淀粉包合农药的方式可以制备出环保、低毒且在一定程度上可以降低农药残留量的绿色农药。

 

　　实施例4：准确称量1g有效成分为96％的烯酰吗啉原药加入到25ml乙醇中完成溶解；再准确称量1g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成1％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入90℃的水浴锅中平衡6h，完成溶解。将25ml烯酰吗啉药液滴加到1％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌10h，6000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥24h，得到50％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药。本法制备的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药粒径在100-500nm之间,包埋率在85％以上。

 

　　取有效成分96％烯酰吗啉原药和上述制备好的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.07ug/ml、0.14ug/ml、0.27ug/ml、0.54ug/ml、1.08ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将马铃薯晚疫病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药和烯酰吗啉原药的培养基上，将马铃薯晚疫病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱18℃黑暗培养10天，测得如下表四所示结果。

 

　　表四50％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药和96％烯酰吗啉原药对马铃薯晚疫病室内活力测定

 

　　从表四数据可知，随着两种农药浓度的增大，对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率也随之增大，且50％纳米烯酰吗啉在5个不同浓度下，对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率差异性呈现出显著水平。而在相同浓度下，50％短链淀粉纳米烯酰吗啉农药和96％的烯酰吗啉原药对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率差异显著；同时，50％短链淀粉纳米烯酰吗啉农药在5个浓度下对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率均高于96％的烯酰吗啉原药，而在浓度为1.08ug/ml时，50％短链淀粉纳米烯酰吗啉农药对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率达到了92.75％，96％的烯酰吗啉原药仅为83.51％。

 

　　再通过表三和表四的数据对比可以看出，在相同的浓度时，50％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药对马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制率都略高于20％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药的抑制率。综上所述，3个农药对马铃薯晚疫病菌丝生长抑制效果是：50％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药＞20％的短链淀粉纳米烯酰吗啉农药＞96％的烯酰吗啉原药。

 

　　实施例5：准确称量2g有效成分为98％的咪鲜胺原药加入到50ml热醋酸中完成溶解；再准确称量8g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成8％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入70℃的水浴锅中平衡1h，完成溶解。将50ml咪鲜胺药液滴加到8％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌2h，3000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥12h，得到20％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药。本法制备的短链淀粉纳米咪鲜胺农药粒径在100-500nm之间,包埋率在65％以上。

 

　　取有效成分98％咪鲜胺原药和上述制备好的短链淀粉纳米咪鲜胺农药粉末分别加入2ml的热醋酸和无菌水配制成5个浓度分别为6ug/ml、12ug/ml、24ug/ml、48ug/ml、96ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将玉米大斑病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米咪鲜胺农药和咪鲜胺原药的培养基上，将玉米大斑病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养8天，测得如下表五所示结果。

 

　　表五20％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药和98％咪鲜胺原药对玉米大斑病室内活力测定

 

　　注：同一列不同大小写字母表示在0.05，0.01水平差异显著。采用DPS7.05版本进行差异性分析，下同。

 

　　从表五中数据可得知，随着20％短链纳米咪鲜胺农药和98％咪鲜胺原药浓度的逐渐增大，抑制率也呈增大趋势。其中，在5个不同浓度下，20％短链淀粉纳米咪鲜胺农药对玉米大斑病菌丝的生长抑制率呈现极显著差异。在浓度为12ug/ml、24ug/ml、48ug/ml和96ug/ml时，两种农药对玉米大斑病的菌丝生长抑制率差异极显著；而在最大浓度96ug/ml时，纳米咪鲜胺农药对玉米大斑病的菌丝生长的抑制率达到了92.45％，咪鲜胺原药的抑制率仅为81.77％。这表明通过短链纳米淀粉制成的纳米咪鲜胺农药对玉米大斑病菌丝生长的抑制效果比原药咪鲜胺要好。同传统农药相比，淀粉本身属于天然的大分子物质，无毒，通过用淀粉包合农药的方式可以制备出环保、低毒且在一定程度上可以降低农药残留量的绿色农药。

 

　　实施例6：准确称量1g有效成分为98％的咪鲜胺原药加入到25ml热醋酸中完成溶解；再准确称量1g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成1％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入90℃的水浴锅中平衡6h，完成溶解。将25ml咪鲜胺药液滴加到1％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌10h，6000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥24h，得到50％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药。本法制备的短链淀粉纳米咪鲜胺农药粒径在100-500nm之间,包埋率在80％以上。

 

　　取有效成分98％咪鲜胺原药和上述制备好的短链淀粉纳米咪鲜胺农药粉末分别加入2ml的热醋酸和无菌水配制成5个浓度分别为6ug/ml、12ug/ml、24ug/ml、48ug/ml、96ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将玉米大斑病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米咪鲜胺农药和咪鲜胺原药的培养基上，将玉米大斑病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养8天，测得如下表六所示结果。

 

　　表六50％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药和98％咪鲜胺原药对玉米大斑病室内活力测定

 

　　从表六数据可知，随着农药浓度的增大，对玉米大斑病的菌丝生长的抑制率也随之增大，且50％短链淀粉纳米咪鲜胺农药在5个不同浓度下，对玉米大斑病菌丝的抑制率差异性呈现出极显著水平；而咪鲜胺原药在5个不同浓度下，对玉米大斑病菌丝的抑制率的差异性在显著水平。同时，50％短链淀粉纳米咪鲜胺农药在5个浓度下的抑制率均高于98％的咪鲜胺原药对玉米大斑病的菌丝生长的抑制率，50％短链淀粉纳米咪鲜胺农药在5个不同浓度下，对玉米大斑病的菌丝生长抑制率在24.05％-94.11％之间，而咪鲜胺原药在18.92％-81.77％之间，这表明，50％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药对玉米大斑病菌丝的抑制生长作用要比咪鲜胺原药好。

 

　　再通过表五和表六的数据对比可以看出，在相同的浓度时，50％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药的抑制率都略高于20％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药的抑制率。综上所述，3个农药对玉米大斑病菌丝生长抑制效果是：50％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药＞20％的短链淀粉纳米咪鲜胺农药＞98％的咪鲜胺原药。

 

　　实施例7：准确称量2g有效成分为95％的己唑醇原药加入到50ml甲醇中完成溶解；再准确称量8g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成8％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入70℃的水浴锅中平衡1h，完成溶解。将50ml己唑醇药液滴加到8％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌2h，3000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥12h，得到20％的短链淀粉纳米己唑醇农药。本法制备的短链淀粉纳米己唑醇农药粒径在100-500nm之间,包埋率在70％以上。

 

　　取有效成分95％己唑醇原药和上述制备好的短链淀粉纳米己唑醇农药粉末分别加入2ml的甲醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.64ug/ml、1.28ug/ml、2.56ug/ml、5.12ug/ml、10.24ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将水稻纹枯病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米己唑醇农药和己唑醇原药的培养基上，将水稻纹枯病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养8天，测得如下表七所示结果。

 

　　表七20％的短链淀粉纳米己唑醇农药和95％己唑醇原药对水稻纹枯病室内活力测定

 

　　注：同一列不同大小写字母表示在0.05，0.01水平差异显著。采用DPS7.05版本进行差异性分析，下同。

 

　　从表七中数据可得知，随着20％的短链纳米己唑醇农药和95％的己唑醇原药浓度的逐渐增大，对水稻纹枯菌丝生长的抑制率也随之增加。其中，在相同浓度下，20％的短链淀粉纳米己唑醇浓度为1.28ug/ml、2.56ug/ml、5.12ug/ml和10.24ug/ml时对水稻纹枯菌丝生长的抑制率都极显著高于己唑醇原药，其中，在10.24ug/ml时20％短链淀粉纳米己唑醇农药对水稻纹枯菌丝生长的抑制率高达97.17％。这表明通过短链纳米淀粉制成的纳米己唑醇农药对水稻纹枯菌丝生长的抑制效果比原药己唑醇要好。与传统农药相比，淀粉本身属于天然的大分子物质，无毒，通过用淀粉包合农药的方式可以制备出环保、低毒且在一定程度上可以降低农药残留量的绿色农药。

 

　　实施例8：准确称量1g有效成分为95％的己唑醇原药加入到25ml甲醇中完成溶解；再准确称量1g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成1％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入90℃的水浴锅中平衡6h，完成溶解。将25ml己唑醇药液滴加到1％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌10h，6000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥24h，得到50％的短链淀粉纳米己唑醇农药。本法制备的短链淀粉纳米己唑醇农药粒径在100-500nm之间,包埋率在80％以上。

 

　　取有效成分95％己唑醇原药和上述制备好的短链淀粉纳米己唑醇农药粉末分别加入2ml的甲醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.64ug/ml、1.28ug/ml、2.56ug/ml、5.12ug/ml、10.24ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将水稻纹枯病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米己唑醇农药和己唑醇原药的培养基上，将水稻纹枯病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱27℃培养8天，测得如下表八所示结果。

 

　　表八50％的短链淀粉纳米己唑醇农药和95％己唑醇原药对水稻纹枯病室内活力测定

 

　　从表八数据可知，随着两种农药浓度的增大，对水稻纹枯菌丝生长的抑制率也随之增大，且同种农药不同浓度对水稻纹枯菌丝生长的抑制率差异性呈现出极显著水平。而在相同浓度下，50％短链淀粉纳米己唑醇农药和95％的己唑醇原药对水稻纹枯菌丝生长的抑制率差异极显著；同时，50％短链淀粉纳米己唑醇农药在5个浓度下对水稻纹枯菌丝生长的抑制率均高于95％的己唑醇原药，而在浓度为10.24ug/ml时，50％短链淀粉纳米己唑醇农药对水稻纹枯菌丝生长的抑制率达到了99％，95％的己唑醇原药仅为86％。

 

　　再通过表七和表八的数据对比可以看出，在相同的浓度时，50％的短链淀粉纳米己唑醇农药对水稻纹枯菌丝生长的抑制率都略高于20％的短链淀粉纳米己唑醇农药的抑制率。综上所述，3个农药对水稻纹枯病菌丝生长抑制效果是：50％的短链淀粉纳米己唑醇农药＞20％的短链淀粉纳米己唑醇农药＞95％的己唑醇原药。

 

　　实施例9：准确称量2g有效成分为98％的氟啶胺原药加入到50ml乙醇中完成溶解；再准确称量8g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成8％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入70℃的水浴锅中平衡1h，完成溶解。将50ml氟啶胺药液滴加到8％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌2h，3000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥12h，得到20％的短链淀粉纳米氟啶胺农药。本法制备的短链淀粉纳米氟啶胺农药粒径在100-500nm之间,包埋率在75％以上。

 

　　取有效成分98％氟啶胺原药和上述制备好的短链淀粉纳米氟啶胺农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.02ug/ml、0.06ug/ml、0.18ug/ml、0.54ug/ml、1.62ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将小麦赤霉病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米氟啶胺农药和氟啶胺原药的培养基上，将小麦赤霉病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱25℃培养7天，测得如下表九所示结果。

 

　　表九20％的短链淀粉纳米氟啶胺农药和98％氟啶胺原药对小麦赤霉病室内活力测定

 

　　注：同一列不同小写字母表示在0.05水平差异显著。采用DPS7.05版本进行差异性分析，下同。

 

　　从表九中数据可得知，随着短链纳米氟啶胺农药和氟啶胺原药浓度的逐渐增大，对小麦赤霉病菌丝生长抑制率也随之增加。其中，在相同浓度下，短链淀粉纳米氟啶胺浓度为0.06ug/ml、0.18ug/ml、0.54ug/ml和1.62ug/ml时对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率都显著高于氟啶胺原药对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率，其中，在1.62ug/ml时短链淀粉纳米氟啶胺农药对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率是92.20％，氟啶胺原药对小麦赤霉病的抑制率仅为82.32％。这表明通过短链纳米淀粉制成的纳米氟啶胺农药对小麦赤霉病的抑制效果比原药氟啶胺要好。与传统农药相比，淀粉本身属于天然的大分子物质，无毒，通过用淀粉包合农药的方式可以制备出环保、低毒且在一定程度上可以降低农药残留量的绿色农药。

 

　　实施例10：准确称量1g有效成分为98％的氟啶胺原药加入到25ml乙醇中完成溶解；再准确称量1g短链纳米淀粉溶解到100ml去离子水中制备成1％的淀粉液，高温高压灭菌30min,将灭菌完成的淀粉液放入40KHz超声机中超声10min进一步溶解，把超声完成的淀粉液放入90℃的水浴锅中平衡6h，完成溶解。将25ml氟啶胺药液滴加到1％的短链纳米淀粉液100ml中，把淀粉液和药液的混合液使用df101s集热式恒温加热磁力搅拌器中进行搅拌10h，6000r/min离心5min，取出沉淀冷冻干燥24h，得到50％的短链淀粉纳米氟啶胺农药。本法制备的短链淀粉纳米氟啶胺农药粒径在100-500nm之间,包埋率在85％以上。

 

　　取有效成分98％氟啶胺原药和上述制备好的短链淀粉纳米氟啶胺农药粉末分别加入2ml的乙醇和无菌水配制成5个浓度分别为0.02ug/ml、0.06ug/ml、0.18ug/ml、0.54ug/ml、1.62ug/ml的药液，一个浓度三个重复，分别将小麦赤霉病病原菌接种到含有以上5个浓度的短链淀粉纳米氟啶胺农药和氟啶胺原药的培养基上，将小麦赤霉病病原菌接种到不含药的培养基上作为空白对照，在培养箱25℃培养7天，测得如下表十所示结果。

 

　　表十50％的短链淀粉纳米氟啶胺农药和98％氟啶胺原药对小麦赤霉病室内活力测定

 

　　从表十数据可知，随着两种农药浓度的增大，抑制率也随着增大，且同种农药不同浓度对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率差异性呈现出显著水平。同时，短链淀粉纳米氟啶胺农药在5个浓度下对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率均显著高于98％的氟啶胺原药的抑制率，而在浓度为1.62ug/ml时，短链淀粉纳米氟啶胺农药对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率达到了94.77％，98％的氟啶胺原药仅为82.32％。

 

　　再通过表九和表十的数据对比可以看出，在相同的浓度时，50％的短链淀粉纳米氟啶胺农药对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率都略高于20％的短链淀粉纳米氟啶胺农药对小麦赤霉病菌丝生长的抑制率。综上所述，3个农药对小麦赤霉病菌丝生长抑制效果是：50％的短链淀粉纳米氟啶胺农药＞20％的短链淀粉纳米氟啶胺农药＞98％的氟啶胺原药。

 

　　本发明未详述之处，均为本技术领域技术人员的公知技术。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。